IL-10 產(chǎn)生型耐受性樹突狀細(xì)胞調(diào)控抗原特異性 B 細(xì)胞應(yīng)答

本文發(fā)表于 Science Advances（2025.11.21），由 Morali 等人完成，系統(tǒng)解析 IL-10 產(chǎn)生型耐受性樹突狀細(xì)胞（Tolerogenic DCs, DC^IL-10）如何通過直接與間接機(jī)制調(diào)控抗原特異性 B 細(xì)胞反應(yīng)。研究揭示 DC^IL-10 在 T 細(xì)胞依賴（TD）與 T 細(xì)胞非依賴（TI）條件下對(duì)人源與動(dòng)物模型 B 細(xì)胞反應(yīng)的調(diào)控作用，并提出將其作為免疫介導(dǎo)疾病的細(xì)胞治療策略的可行性

背景

B 細(xì)胞通過產(chǎn)生抗體、進(jìn)行抗原呈遞參與多種免疫反應(yīng)，并在自身免疫病及移植排斥反應(yīng)中具有重要致病作用。當(dāng)前 B 細(xì)胞靶向治療（如抗 CD20、CAR-T）有效但伴隨廣泛免疫抑制。在此背景下，選擇性負(fù)調(diào)控抗原特異性 B 細(xì)胞反應(yīng)成為新的治療需求。

耐受性樹突狀細(xì)胞（tolDC）可誘導(dǎo) T 細(xì)胞耐受，其中 IL-10 處理或 IL-10 基因修飾的 DC（DC^IL-10）在臨床前研究中可誘導(dǎo) Treg 或 Tr1 細(xì)胞。然而，其對(duì) B 細(xì)胞的直接及間接調(diào)控作用仍未清晰。

本研究通過體外人源細(xì)胞體系、體內(nèi) humanized mouse 模型、以及 TI/TD 小鼠免疫模型系統(tǒng)性解析 DC^IL-10 對(duì) B 細(xì)胞的雙重調(diào)控作用。

結(jié)論1 建立 DCIL-10 調(diào)控 B 細(xì)胞反應(yīng)的體外模型體系

通過篩選多組 TLR 激動(dòng)劑 + IL-2 條件，作者確定了能誘導(dǎo) na?ve（CpG/IL-2） 和 memory（R848/IL-2） B 細(xì)胞處于“亞zui適激活"狀態(tài)的刺激體系，并證實(shí)該體系不改變 DC^IL-10 的耐受性表型。IL-10R 在兩類 B 細(xì)胞上表達(dá)穩(wěn)定，而外源 IL-10 僅增強(qiáng) 記憶 B 細(xì)胞增殖。該體系為后續(xù)分辨 DCIL-10 對(duì)不同 B 細(xì)胞亞群的調(diào)控作用奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

Fig1. DC^IL-10 調(diào)控 B 細(xì)胞反應(yīng)的體外模型體系建立

結(jié)論2 DC^IL-10 輕度增強(qiáng) na?ve B 細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)初級(jí) IgG 轉(zhuǎn)換，需依賴細(xì)胞接觸

在無(wú) T 細(xì)胞條件下，CpG/IL-2 聯(lián)合 DC^IL-10 可增強(qiáng) na?ve B 細(xì)胞增殖，并推動(dòng) CD38?CD27? 抗體分泌細(xì)胞樣 B 細(xì)胞與 IgG? B 細(xì)胞的產(chǎn)生；而 DC^GFP 或 IL-10 單獨(dú)則無(wú)法誘導(dǎo)此分化。Transwell 阻斷顯示上述效應(yīng)wan全依賴 DCIL-10 與 B 細(xì)胞的直接接觸。說(shuō)明 DC^IL-10 可直接驅(qū)動(dòng) na?ve B 細(xì)胞進(jìn)行輕度分化，促進(jìn)入門級(jí) IgG 轉(zhuǎn)換。

Fig2. DC^IL-10和 DC^GFP對(duì)受刺激的幼稚 B 細(xì)胞的影響。

結(jié)論3 DC^IL-10 與 IL-2 協(xié)同，大幅促進(jìn) 記憶 B 細(xì)胞增殖、漿細(xì)胞化與IgG/ IgG1/ IgG4 分泌

在 R848/IL-2 刺激下加入 DC^IL-10，顯著增強(qiáng) 記憶 B 細(xì)胞增殖，并強(qiáng)力誘導(dǎo) CD38?CD27? 抗體分泌細(xì)胞。雖然 IgG? B 細(xì)胞比例下降，但培養(yǎng)上清中 總 IgG、IgG1 與 IgG4 大幅升高，顯示 DC^IL-10 推動(dòng)記憶 B 細(xì)胞快速分化為分泌型漿細(xì)胞。對(duì)照實(shí)驗(yàn)顯示 IL-10 與 IL-2 構(gòu)成核心信號(hào)軸，R848 無(wú) IL-2 聯(lián)合 DC^IL-10 無(wú)法產(chǎn)生同樣效應(yīng)，確立該調(diào)控的依賴性。

Fig3. DC^IL-10對(duì)受刺激的記憶 B 細(xì)胞的影響

結(jié)論4 DCIL-10 對(duì) memory B 細(xì)胞的促進(jìn)作用主要由分泌 IL-10 而非接觸介導(dǎo)

Transwell 實(shí)驗(yàn)證明 DC^IL-10 在無(wú)接觸條件下仍可增強(qiáng) 記憶 B 細(xì)胞增殖、促進(jìn) IgG 分泌，但 IgG4 誘導(dǎo)在接觸條件下更強(qiáng)，提示部分接觸貢獻(xiàn)。加入抗 IL-10 抗體可wan全逆轉(zhuǎn) DCIL-10 的促進(jìn)效應(yīng)，而抗 IL-6 無(wú)影響。說(shuō)明 DCIL-10 通過 IL-10（主要）+ 接觸信號(hào)（次要）調(diào)控 memory B 細(xì)胞分化與 IgG4 轉(zhuǎn)換。

Fig4. DC ^IL-10通過 IL-10 調(diào)節(jié)記憶 B 細(xì)胞。

結(jié)論5 在存在 T 細(xì)胞的條件下，DC^IL-10 抑制記憶 B 細(xì)胞的抗原特異性應(yīng)答，機(jī)制來(lái)自抑制 CD4? T 細(xì)胞激活

在 R848 + CD4? T 細(xì)胞體系中，DC^IL-10 明顯減弱記憶 B 細(xì)胞的增殖與 IgG 分泌，相比 DC^GFP 顯著降低 CD4? T 細(xì)胞增殖及 CD40L 表達(dá)。TT 特異性體系進(jìn)一步顯示，DC^IL-10 抑制 TT-特異性 B 細(xì)胞擴(kuò)增，同時(shí)削弱 TT-特異性 T 細(xì)胞活化。表明 DC^IL-10 在 T 細(xì)胞依賴性反應(yīng)中通過 誘導(dǎo) T 細(xì)胞低反應(yīng)性（hyporesponsive） 間接抑制抗原特異性 B 細(xì)胞應(yīng)答。

Fig5. DC ^IL-10通過抑制 T 細(xì)胞來(lái)調(diào)節(jié)記憶 B 細(xì)胞

結(jié)論6 人源細(xì)胞給予小鼠，DC^IL-10 體內(nèi)給藥可抑制人源 IgG 的二次應(yīng)答

在人源化 NSG 小鼠模型中，免疫后給予自體 DC 或 DC + DC^IL-10 增強(qiáng)刺激。DC^IL-10 組人類 IgG 上升受抑（趨勢(shì)顯著，但因個(gè)體差異未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)），IgM 無(wú)明顯影響，而脾臟 B 細(xì)胞比例正常。說(shuō)明 DC^IL-10 可 在體內(nèi)壓制人類 B 細(xì)胞的 IgG 類抗體回憶反應(yīng)，與其誘導(dǎo)的抑制性 T 細(xì)胞環(huán)境一致。

Fig6. DC ^IL-10降低了人源化小鼠中人 IgG 的誘導(dǎo)

結(jié)論7 在鼠源模型中，抗原特異性的 DCIL-10 同樣抑制 IgG 誘導(dǎo)并阻斷抗原特異性 B 細(xì)胞擴(kuò)增

在抗原特異性小鼠模型中，給予 Ag-pulse 的 DC^IL-10 并不會(huì)促進(jìn) IgG? B 細(xì)胞或抗原特異性 IgG 產(chǎn)生。結(jié)合過去作者研究，DC^IL-10 可誘導(dǎo)抗原特異性 Tr1 細(xì)胞，推測(cè)在體內(nèi)抑制 B 細(xì)胞擴(kuò)增機(jī)制來(lái)自 T 細(xì)胞輔助信號(hào)被 DC^IL-10 改變。這證明DC^IL-10 在 T 細(xì)胞依賴性途徑中可強(qiáng)效降低特異性 B 細(xì)胞反應(yīng)。

Fig7. DC ^IL-10在體內(nèi)調(diào)節(jié)抗原特異性抗體的產(chǎn)生

研究亮點(diǎn)總結(jié)

雙重調(diào)控：既增強(qiáng) TI（無(wú) T）條件下的 B 細(xì)胞分化，也抑制 TD 條件下的抗原特異性 B 細(xì)胞反應(yīng)。分子核心為 IL-10 + IL-2 軸，DC^IL-10 分泌 IL-10，結(jié)合 IL-2 骨架信號(hào)驅(qū)動(dòng) B 細(xì)胞行為再編程。對(duì)健康免疫有選擇性調(diào)節(jié)優(yōu)勢(shì)：增強(qiáng)非特異性 B 細(xì)胞代謝活性，同時(shí)抑制致病性、抗原特異性的 IgG 反應(yīng)。與 Tr1 誘導(dǎo)相連接，可能形成更穩(wěn)定的免疫耐受微環(huán)境。