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小鼠脾臟單細(xì)胞懸液的制備方法

發(fā)布時間： 2024-06-14　　點(diǎn)擊次數(shù)： 2766次

1. 8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。
2. 在75%的酒精中，浸泡5min。
3. 無菌狀態(tài)下取脾臟。
4. 取一干凈10cm大皿，放入無菌的70um濾網(wǎng)，將脾臟置于濾網(wǎng)上，加入2ml培養(yǎng)基。
5. 用研磨棒輕輕研磨臟器，將脾臟組織研磨成單細(xì)胞狀態(tài)，直到只剩下臟器的結(jié)締組織為止。
6. 研磨時動作應(yīng)輕柔，用力過大可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
7. 棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結(jié)締組織，收集平皿內(nèi)的細(xì)胞懸液，400g4min離心沉淀。
8. 用PBS重懸沉淀，就可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

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